وصف تصميم مختبر PCR

وصف تصميم مختبر PCR

ال PCR ينقسم المختبر إلى أربعة مجالات. يجب أن يكون الدخول إلى كل منطقة عمل في اتجاه واحد. تستخدم مناطق العمل المختلفة ملابس عمل مختلفة (على سبيل المثال ، ألوان مختلفة). عندما يغادر الموظفون مناطق العمل ، لا يُسمح لهم بإخراج ملابس عملهم. المجالات الأربعة هي:

1. منطقة إعداد الكاشف ن

2. منطقة معالجة العينة ن

3. منطقة تضخيم الحمض النووي ن

4. منطقة تحليل المنتج ن

إذا تم استخدام محلل كامل أوتوماتيكي ، فيمكن الجمع بين المناطق بشكل مناسب ، ويمكن دمج المناطق الثلاث والأربع لتحليل منتج التضخيم.

وظائف كل منطقة PCR هي:

منطقة إعداد الكاشف: التحضير ، التجميع الفرعي وتخزين الكواشف التضخيم.

منطقة معالجة العينة: تسجيل العينة والتعبئة. استخراج الحمض النووي والتخزين وأخذ العينات.

مجال تحليل منتج التضخيم: التحديد ، تحليل النتائج ، تسجيل وتقرير منتجات التضخيم.

يجب فصل منطقة التضخيم المسبقة ومنطقة ما بعد التضخيم بشكل صارم ، ويجب استخدام غرف مختلفة. من الأفضل أن يكون لديك فاصل زمني معين بين المنطقتين.

يمكن إعداد كمية صغيرة من الكاشف في منطقة معالجة العينات باستخدام المجموعة التجارية.

على أساس أنه يتم استيفاء متطلبات التشغيل والتنظيف التالية ، يمكن تعيين منطقة معالجة العينات ومنطقة إعداد الكاشف في نفس الغرفة:

تعمل في خزانة السلامة الحيوية.

استخدم كل مجرب ومجموعة تجريبية الكواشف والمواد الاستهلاكية الخاصة بهم.

يجب أن تكون الحاويات التي تحتوي على مواد ملوثة مختومة ويمكن التخلص منها.

استخدم طرقًا فعالة لتنظيف وتطهير منطقة التشغيل والمعدات المشتركة قبل التجربة وبعدها.

متطلبات تصميم PCR

يمكن أن تكون مختبرات PCR في شكل تشتت أو مزيج ، والآن المزيج هو التيار الرئيسي. لإكمال مجموعة من تجارب PCR ، فإن إعداد الكاشف ، ومعالجة العينات ، وتضخيم الحمض النووي وتحليل المنتج عادة ما تكون أربع عمليات تجريبية. إذا كانت العملية التجريبية تتطلب ، فيجب إضافة عملية سحق العينة.

1 、 شكل مشتت PCR مختبر

يشير ما يسمى مختبر PCR اللامركزي إلى الغرف التجريبية التي تكمل العملية التجريبية أعلاه ، والتي تكون بعيدة عن بعضها البعض ويتم توزيعها. بالنسبة لمختبر PCR مع هذا الترتيب ، نظرًا لأن كل تجربة ليس من السهل التدخل مع بعضها البعض ، فليس هناك حاجة لظروف خاصة.

2 、 الشكل المشترك: مختبر PCR

يشير ما يسمى مختبر PCR مجتمعة إلى النموذج الذي يتم فيه ترتيب الغرف التجريبية التي تكمل العمليات التجريبية الأربعة لـ PCR المجاورة لبعضها البعض لتشكيل منطقة تجريبية مستقلة. بالنسبة لمختبر PCR مجتمعة ، نظرًا لأن كل مختبر مرتبة مركزيًا ، فمن السهل التسبب في تداخل متبادل. لذلك ، هناك متطلبات معينة لنظام التخطيط والحاجز الكلي. يتم تزويد كل غرفة بغرفة عازلة عند مدخل تقليل التبادل الداخلي والخارجي.

يجب أن تكون غرفة إعداد الكاشف وغرفة معالجة العينة ضغطًا إيجابيًا قليلاً لمنع الهواء الذي يحتوي على الهباء الجوي للحمض النووي من الدخول والتسبب في التلوث. يمكن تحقيق تأثير الضغط الإيجابي عن طريق التحكم في حجم الهواء المدخل ليكون أكبر من حجم هواء العادم.

يجب أن تحتوي غرفة تضخيم الحمض النووي وغرفة تحليل المنتج على ضغط سلبي صغير لمنع الهباء الجوي الذي يحتوي على الحمض النووي من الانتشار لتلوث الكاشف والعينة. يمكن تحقيق تأثير الضغط السلبي عن طريق التحكم في حجم هواء العادم ليكون أكبر من حجم الهواء المدخل.

في ظل الظروف المثالية ، يمكن ضبط الضغط الإيجابي في غرفة المختبر العازلة في مختبر PCR ، بحيث لا يتدفق الهواء الداخلي في الهواء الطلق ولا يتدفق الهواء الخارجي إلى الداخل.

يتم التحكم في مدخل الهواء في مختبر PCR بواسطة مكيف الهواء المركزي الأصلي. مطلوب لتثبيت منفذ الهواء لمكيف الهواء المركزي في النقطة المحددة ، والارتفاع 2600 ملم بعد رصف الأرض.

إذا تم استخدام أداة PCR الفلورية ، فيمكن الجمع بين غرفة التضخيم وغرفة تحليل المنتج.

إذا سمح عمق الغرفة ، يمكن ضبط ممر مخصص داخل PCR. تجدر الإشارة إلى أن غرفة المخزن المؤقت أكثر أهمية من الممر المخصص في الحد من التبادل الداخلي والخارجي.

يجب أن يكون لكل منطقة تدفق عملية تجريبي أحادي الاتجاه ، واللوجستيات ، وتدفق الأشخاص وتدفق الهواء لتشكيل حاجز وقائي لتدفق في اتجاه واحد ، وتجنب التداخل المتبادل بين التجارب ، ومنع الهباء الجوي للحمض النووي من تلويث العملية التجريبية وإنتاج نتائج خاطئة.

يجب أن تكون جدران المختبر ، بما في ذلك السقف ، هيكلًا ثابتًا وضيق الهواء الجيد ؛ يجب أن تتبنى جميع الزوايا الداخلية خطوطًا على شكل قوس للانتقال ؛ الجدار الداخلي للجدار نظيف ، غير امتصاص ، مقاوم للتآكل ، سهل التنظيف والتطهير ؛ يجب أن تلبي المواد الأرضية متطلبات عدم وجود فجوة ، ولا تسرب ، ونعومة ومقاومة للتآكل.

إذا تم استخدام أداة PCR الفلورية ، فيمكن الجمع بين غرفة التضخيم وغرفة تحليل المنتج.

إذا سمح عمق الغرفة ، يمكن ضبط ممر مخصص داخل PCR. تجدر الإشارة إلى أن غرفة المخزن المؤقت أكثر أهمية من الممر المخصص في الحد من التبادل الداخلي والخارجي.

يجب أن يكون لكل منطقة تدفق عملية تجريبي أحادي الاتجاه ، واللوجستيات ، وتدفق الأشخاص وتدفق الهواء لتشكيل حاجز وقائي لتدفق في اتجاه واحد ، وتجنب التداخل المتبادل بين التجارب ، ومنع الهباء الجوي للحمض النووي من تلويث العملية التجريبية وإنتاج نتائج خاطئة.

يجب أن تكون جدران المختبر ، بما في ذلك السقف ، هيكلًا ثابتًا وضيق الهواء الجيد ؛ يجب أن تتبنى جميع الزوايا الداخلية خطوطًا على شكل قوس للانتقال ؛ الجدار الداخلي للجدار نظيف ، غير امتصاص ، مقاوم للتآكل ، سهل التنظيف والتطهير ؛ يجب أن تلبي المواد الأرضية متطلبات عدم وجود فجوة ، ولا تسرب ، ونعومة ومقاومة للتآكل.