تخطيط الطائرة لمختبر PCR

تخطيط الطائرة من PCR معمل

من حيث المبدأ ، ينقسم مختبر تضخيم الجينات السريرية إلى أربعة مناطق عمل منفصلة: مساحة تخزين وإعداد الكاشف ، ومنطقة إعداد العينة ، وإعداد خليط تفاعل التضخيم ، ومنطقة تحليل منتج التضخيم. من أجل تجنب التلوث المتقاطع ، يجب أن يتبع دخول كل منطقة عمل بشكل صارم اتجاهًا واحدًا ، أي فقط من منطقة تخزين الكاشف والتحضير → منطقة إعداد العينة → إعداد خليط تفاعل التضخيم وتضخيم منطقة تحليل منتج التضخيم.

يتم نقل الكواشف والعينات بين المناطق التجريبية من خلال نافذة النقل.

(3) تصميم نظام التكييف والتهوية والتحكم في الضغط في مختبر PCR

لا توجد متطلبات تنقية صارمة لمختبرات PCR ، ولكن من أجل تجنب إمكانية التلوث المتقاطع بين مختلف المجالات التجريبية ، من المناسب اعتماد نموذج توزيع الهواء لجميع الإرسال وجميع التفريغ. في الوقت نفسه ، يجب التحكم في نسبة إمدادات الهواء والعادم بشكل صارم لضمان متطلبات الضغط في كل منطقة تجريبية.

منطقة تخزين وإعداد الكاشف

العمليات الرئيسية في هذه المنطقة التجريبية هي إعداد كواشف التخزين ، والتعبئة الفرعية للكواشف وإعداد خليط التفاعل الرئيسي. يجب نقل الكواشف والمواد المستخدمة لإعداد العينة مباشرة إلى هذه المنطقة ولا تمر عبر مناطق أخرى. يجب تخزين المواد الخام الكاشف في هذه المنطقة وإعدادها في كواشف التخزين المطلوبة في هذه المنطقة.

لا توجد متطلبات صارمة للتحكم في ضغط تدفق الهواء في هذا المجال.

منطقة إعداد العينة

العمليات الرئيسية في هذا المجال هي الحفاظ على العينات السريرية ، واستخراج وتخزين الأحماض النووية (الحمض النووي الريبي والحمض النووي) ، وتوليف [كدنا] عند إضافته إلى أنبوب تفاعل التضخيم ويتم قياس الحمض النووي الريبي.

مطلوب التدرج الضغط في هذه المنطقة ليكون ضغطًا إيجابيًا بالنسبة للمنطقة المجاورة لتجنب دخول تلوث الهباء الجوي إلى هذه المنطقة من المنطقة المجاورة. بالإضافة إلى ذلك ، نظرًا لأن تلوث الهباء الجوي قد يحدث أثناء عملية أخذ العينات ، يجب تجنب المشي غير الضروري في المنطقة.

إعداد خليط تفاعل التضخيم وتضخيمه

العملية الرئيسية في هذه المنطقة هي تضخيم الحمض النووي أو [كدنا]. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أيضًا تنفيذ إضافة قالب الحمض النووي المعدل ودعم [كدنا . في تحديد PCR المتداخل ، يجب فتح أنبوب التفاعل بعد الجولة الأولى من التضخيم ، لذلك التضخيم المتداخل لديه خطر كبير من التلوث ، ويجب إجراء أخذ العينات الثانية في هذه المنطقة.

مطلوب التدرج الضغط في هذه المنطقة ليكون ضغطًا سلبيًا بالنسبة للمنطقة المجاورة لتجنب تسرب الهباء الجوي من هذه المنطقة. من أجل تجنب التلوث الناجم عن الهباء الجوي ، ينبغي تقليل المشي غير الضروري في المنطقة. يجب تنفيذ العمليات الفردية مثل إضافة العينة في مقعد نظيف للغاية.

منطقة تحليل منتج التضخيم

العملية الرئيسية في هذا المجال هي تحديد الشظايا المتضخمة. إذا تم استخدام أداة تحليلية مغلقة كاملة التلقائية للكشف ، فقد لا يتم تعيين هذه المنطقة.

هذه المنطقة هي المصدر الرئيسي لتلوث منتجات التضخيم ، وبالتالي فإن التدرج في الضغط في هذه المنطقة مطلوب ليكون ضغطًا سلبيًا بالنسبة للمنطقة المجاورة ، وذلك لمنع منتج التضخيم من الانتشار من هذه المنطقة إلى مناطق أخرى.

(4) منع التلوث والسيطرة عليه

المشكلة الأساسية لتصميم مختبر PCR هي كيفية تجنب التلوث. في العمل العملي ، تكون الأنواع التالية من التلوث شائعة: تلوث منتجات التضخيم ؛ تلوث الحمض النووي الجيني الطبيعي. تلوث الكواشف والعينات. بمجرد حدوث التلوث ، يجب إيقاف التجربة حتى يتم العثور على مصدر التلوث ، ويجب إبطال النتائج التجريبية ويجب تنفيذ التجربة مرة أخرى. لذلك ، ليس من المستهلكة للوقت والمرهقة العثور على مصدر التلوث حول المختبر بعد حدوث التلوث ، مما يضيع القوى العاملة والموارد المادية. لذلك ، لتجنب التلوث ، يجب أن تكون الوقاية هي الخطوة الأولى ، وليس القضاء.